LAPORAN SMEST3-KROMATOGRAFI

LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM KROMATOGRAFI

“KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS SECARA DENSITOMETER (TLC SCANNER) III”

Disusun oleh :

Dinda Nur M                (17113117A)

Lenny Agustinasari       (17113129A)

Vini Karus S                 (17113246A)

Kelompok : 2

Surakarta, 29 September 2012

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SETIA BUDI

SURAKARTA

2012

         I.          JUDUL PRAKTIKUM

Kromatografi Lapis Tipis Secara Densitometer (TLC scanner) III

      II.          TUJUAN PRAKTIKUM

Untuk memperoleh panjang gelombang ( λ ) optimum dari seluruh noda / bercak pada lempeng KLT yang akan dianalisis

 III.            DASAR TEORI

 IV.            ALAT DAN BAHAN

            ALAT : TLC Scanner CS – 930 IPC Shimadzu

            BAHAN : Lempeng KLT yang telah dielusi dan berisi standar dan campuran sampel

    V.            CARA KERJA

·      Menghubungkan alat TLC Scanner CS – 930 IPC kemudian ON – kan 

·      Meletakkan lempeng KLT yang akan diAnalisa pada lempeng yang telah di letakkan

·      Menentukan letak sumbu x, dengan mengatur tombol penggeser, catat angka yang terlihat

·      Menentukan letak sumbu y₁ dan y₂, dengan mengatur tombol penggeser, catat angka yang terlihat

·      Klik icon lambda, inputkan nilai lambda (400, 450, 500, 550. 600)

·      Klik icon scanner, klik parameter, klik change, klik autolane

·      Inputkan nilai x, y₁ dan y_2, klok ok

·      Klik star, inputkan nama analis, sample, komentar, klik ok, tunggu prosses scanning selesai

·      Pada icon save block klik file, klik save all

·      Pada icon make a new block, inputkan nama analis klik ok

·      Untuk mengeprint, klik print, klik plot out

·      Klik preview, akan muncul grafik data parameter, klik enter, cetak hasil dengan klik ok

·      Untuk memperoleh data kromatografi yang baik, lakukan integrasi secara manual

·      Mengulangi percobaan dengan cara merubah panjang gelombang dan atau merubah letak analisis pada noda 

 VI.            DATA

NOMOR	PANJANG GELOMBANG (λ)	WARNA	JARAK TEMPUH	AREA
1	400	Merah	24.00	54.702
		Kuning	30.26	700.933
		Merah muda	34.76	281.394
		Biru	44.53	107.407
		Coklat	51.40	207.740
2	450	Merah	23.90	51.057
		Kuning	30.26	515.878
		Merah muda	34.85	405.429
		Biru	45.03	54.223
		Coklat	51.41	411.826
3	500	Merah	23.94	124.655
		Kuning	-	-
		Merah muda	34.93	591.341
		Biru	-	-
		Coklat	51.42	370.576
4	550	Merah	23.94	135.328
		Kuning	-	-
		Merah muda	34.94	490.946
		Biru	46.47	82.930
		Coklat	51.41	220.476
4	600	Merah	-	-
		Kuning	-	-
		Merah muda	34.79	62.383
		Biru	45.69	190.161
		Coklat	-	-

VII.            PEMBAHASAN

                        Pada praktikum kali ini  adalah percobaan kromatografi lapis tipis secara densitometer. Dalam praktikum ini mahasiswa diharapkan dapat mengerti cara mencari panjang gelombang ( λ ) optimum dari beberapa noda yang ada di lempeng KLT yang akan dianalisis.

                        Panjang gelombang ( λ ) optimum tentunya berbeda dengan panjang gelombang ( λ ) maksimum. Jika panjang gelombang ( λ ) maksimum dicari dengan melakukan scanning pada 1 bercak/noda saja, lain halnya dengan panjang gelombang ( λ ) optimum. Panjang gelombang ( λ ) optimum dapat diketahui dengan melakukan scanning pada beberapa bercak/noda yang dianalisa, dimana dalam praktikum ini ada 5 bercak/noda yang berbeda intensitas warnanya yaitu merah, kuning, merah muda, biru, dan coklat yang akan dianalisa jarak tempuh dan areanya dengan densitometer. Dengan kata lain, panjang gelombang ( λ ) optimum adalah panjang gelombang ( λ ) yang dapat menampilkan/membaca 5 pick sekaligus.

                        Tahap pertama yaitu meletakan lempeng KLT pada alat scanner, lalu cari posisi x, y₁, dan y₂ dengan megatur tombol penggeser sehingga dapat dipastikan sinar hijau pada scanner dapat melewati semua bercak/noda dalam satu garis lurus. Setelah diperoleh data x, y₁, dan y₂ lakukan scanner dengan 5 macam panjang gelombang ( λ ) yaitu 400, 450. 500, 550, 600.

                        Dari data hasil praktikum dapat dilihat bahwa setiap panjang gelombang ( λ )  yang berbeda akan menghasilkan pembacaan jarak tempuh dan area yang berbeda pula. Pada proses scanning dengan panjang gelombang ( λ ) 400, kelima pick/warna dapat ditampilkan seluruhnya, begitu pula pada proses scanning dengan panjang gelombang ( λ ) 450. Lain halnya dengan proses scanning dengan panjang gelombang ( λ ) 500, 550, dan 600 yang hanya bisa menampilkan beberapa pick/warna saja. Pada panjang gelombang ( λ ) 500 hanya dapat ditampilkan jarak tempuh dan area dari bercak/noda warna merah, merah muda, dan coklat, sedangkan pada panjang gelmbang ( λ ) 550 tidak dapat menampilkan jarak tempuh dan area dari bercak/noda warna kuning. Panjang gelombang ( λ ) yang paling sedikit menampilkan informasi mengenai jarak tempuh dan area dari bercak/noda pada lempeng KLT adalah panjang gelombang ( λ ) 600, yaitu hanya bisa menampilkan pick/warna merah muda dan biru saja.

                        Kembali ke pengertian dari panjang gelombang ( λ ) optimum yaitu panjang gelombang ( λ ) yang dapat menampilkan 5 pick/warna sekaligus. Jika kita melihat pada tabel data hasil praktikum, dapat diketahui bahwa ada 2 panjang gelombang yang dapat menampilkan 5 pick/warna sekaligus yaitu pada panjang gelombang ( λ ) 450 dan 400, maka kedua panjang gelombang ( λ ) tersebut dapat disebut dengan panjang gelombang ( λ ) optimum. Namun perlu ditentukan juga panjang gelombang ( λ )  optimum yang lebih tepat, yaitu dengan cara membandingkan total area pada panjang gelombang ( λ ) masing-masing. Total area pada panjang gelombang ( λ ) 400 adalah 1376,225 dan pada panjang gelombang ( λ ) 450 adalah 1466,846 [total area dapat dilihat di lampiran print out data hasil scanning]. Panjang gelombang ( λ ) dengan total area yang lebih banyak adalah panjang gelombang yang lebih maksimal dalam membaca area bercak/noda pada lempeng KLT, dan dapat disimpulkan bahwa panjang gelombang ( λ ) optimumnya yaitu pada panjang gelombang ( λ ) 450.

VIII.            KESIMPULAN

·         Panjang gelombang ( λ ) optimum diperoleh dengan melakukan scanning pada beberapa bercak/noda pada lempeng KLT sekaligus

·         Panjang gelombang ( λ ) optimum adalah panjaang gelombang yang dapat menampilkan beberapa pick/warna sekaligus

·         Panjang gelombang ( λ ) optimum pada praktikum kali ini adalah panjang gelombang ( λ ) 450

 IX.            DAFTAR PUSTAKA

R. Stock and C. B. F. Rice. “Chromatographic methods” 2nd edition, 1967. Chapman                   and Hall Ltd., and Science Paper backs.

R. J Bannec, The Australian Science Teachers Journal. December

 1972, Vol. 18 no 4 p 79-84

Hostettmann. M, Hostettmann.K,Marston.A,cara kromatografi preparatif,1995.ITB Bandung

                http://greenhati.blogspot.com/2009/01/kromatografi-lapis-tipis.html

LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM KROMATOGRAFI

“KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS SECARA DENSITOMETER (TLC SCANNER) III”

Disusun oleh :

Dinda Nur M                (17113117A)

Lenny Agustinasari       (17113129A)

Vini Karus S                 (17113246A)

Kelompok : 2

Surakarta, 29 September 2012

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SETIA BUDI

SURAKARTA

2012

         I.          JUDUL PRAKTIKUM

Kromatografi Lapis Tipis Secara Densitometer (TLC scanner) III

      II.          TUJUAN PRAKTIKUM

Untuk memperoleh panjang gelombang ( λ ) optimum dari seluruh noda / bercak pada lempeng KLT yang akan dianalisis

 III.            DASAR TEORI

 IV.            ALAT DAN BAHAN

            ALAT : TLC Scanner CS – 930 IPC Shimadzu

            BAHAN : Lempeng KLT yang telah dielusi dan berisi standar dan campuran sampel

    V.            CARA KERJA

·      Menghubungkan alat TLC Scanner CS – 930 IPC kemudian ON – kan 

·      Meletakkan lempeng KLT yang akan diAnalisa pada lempeng yang telah di letakkan

·      Menentukan letak sumbu x, dengan mengatur tombol penggeser, catat angka yang terlihat

·      Menentukan letak sumbu y₁ dan y₂, dengan mengatur tombol penggeser, catat angka yang terlihat

·      Klik icon lambda, inputkan nilai lambda (400, 450, 500, 550. 600)

·      Klik icon scanner, klik parameter, klik change, klik autolane

·      Inputkan nilai x, y₁ dan y_2, klok ok

·      Klik star, inputkan nama analis, sample, komentar, klik ok, tunggu prosses scanning selesai

·      Pada icon save block klik file, klik save all

·      Pada icon make a new block, inputkan nama analis klik ok

·      Untuk mengeprint, klik print, klik plot out

·      Klik preview, akan muncul grafik data parameter, klik enter, cetak hasil dengan klik ok

·      Untuk memperoleh data kromatografi yang baik, lakukan integrasi secara manual

·      Mengulangi percobaan dengan cara merubah panjang gelombang dan atau merubah letak analisis pada noda 

 VI.            DATA

NOMOR	PANJANG GELOMBANG (λ)	WARNA	JARAK TEMPUH	AREA
1	400	Merah	24.00	54.702
		Kuning	30.26	700.933
		Merah muda	34.76	281.394
		Biru	44.53	107.407
		Coklat	51.40	207.740
2	450	Merah	23.90	51.057
		Kuning	30.26	515.878
		Merah muda	34.85	405.429
		Biru	45.03	54.223
		Coklat	51.41	411.826
3	500	Merah	23.94	124.655
		Kuning	-	-
		Merah muda	34.93	591.341
		Biru	-	-
		Coklat	51.42	370.576
4	550	Merah	23.94	135.328
		Kuning	-	-
		Merah muda	34.94	490.946
		Biru	46.47	82.930
		Coklat	51.41	220.476
4	600	Merah	-	-
		Kuning	-	-
		Merah muda	34.79	62.383
		Biru	45.69	190.161
		Coklat	-	-

VII.            PEMBAHASAN

                        Pada praktikum kali ini  adalah percobaan kromatografi lapis tipis secara densitometer. Dalam praktikum ini mahasiswa diharapkan dapat mengerti cara mencari panjang gelombang ( λ ) optimum dari beberapa noda yang ada di lempeng KLT yang akan dianalisis.

                        Panjang gelombang ( λ ) optimum tentunya berbeda dengan panjang gelombang ( λ ) maksimum. Jika panjang gelombang ( λ ) maksimum dicari dengan melakukan scanning pada 1 bercak/noda saja, lain halnya dengan panjang gelombang ( λ ) optimum. Panjang gelombang ( λ ) optimum dapat diketahui dengan melakukan scanning pada beberapa bercak/noda yang dianalisa, dimana dalam praktikum ini ada 5 bercak/noda yang berbeda intensitas warnanya yaitu merah, kuning, merah muda, biru, dan coklat yang akan dianalisa jarak tempuh dan areanya dengan densitometer. Dengan kata lain, panjang gelombang ( λ ) optimum adalah panjang gelombang ( λ ) yang dapat menampilkan/membaca 5 pick sekaligus.

                        Tahap pertama yaitu meletakan lempeng KLT pada alat scanner, lalu cari posisi x, y₁, dan y₂ dengan megatur tombol penggeser sehingga dapat dipastikan sinar hijau pada scanner dapat melewati semua bercak/noda dalam satu garis lurus. Setelah diperoleh data x, y₁, dan y₂ lakukan scanner dengan 5 macam panjang gelombang ( λ ) yaitu 400, 450. 500, 550, 600.

                        Dari data hasil praktikum dapat dilihat bahwa setiap panjang gelombang ( λ )  yang berbeda akan menghasilkan pembacaan jarak tempuh dan area yang berbeda pula. Pada proses scanning dengan panjang gelombang ( λ ) 400, kelima pick/warna dapat ditampilkan seluruhnya, begitu pula pada proses scanning dengan panjang gelombang ( λ ) 450. Lain halnya dengan proses scanning dengan panjang gelombang ( λ ) 500, 550, dan 600 yang hanya bisa menampilkan beberapa pick/warna saja. Pada panjang gelombang ( λ ) 500 hanya dapat ditampilkan jarak tempuh dan area dari bercak/noda warna merah, merah muda, dan coklat, sedangkan pada panjang gelmbang ( λ ) 550 tidak dapat menampilkan jarak tempuh dan area dari bercak/noda warna kuning. Panjang gelombang ( λ ) yang paling sedikit menampilkan informasi mengenai jarak tempuh dan area dari bercak/noda pada lempeng KLT adalah panjang gelombang ( λ ) 600, yaitu hanya bisa menampilkan pick/warna merah muda dan biru saja.

                        Kembali ke pengertian dari panjang gelombang ( λ ) optimum yaitu panjang gelombang ( λ ) yang dapat menampilkan 5 pick/warna sekaligus. Jika kita melihat pada tabel data hasil praktikum, dapat diketahui bahwa ada 2 panjang gelombang yang dapat menampilkan 5 pick/warna sekaligus yaitu pada panjang gelombang ( λ ) 450 dan 400, maka kedua panjang gelombang ( λ ) tersebut dapat disebut dengan panjang gelombang ( λ ) optimum. Namun perlu ditentukan juga panjang gelombang ( λ )  optimum yang lebih tepat, yaitu dengan cara membandingkan total area pada panjang gelombang ( λ ) masing-masing. Total area pada panjang gelombang ( λ ) 400 adalah 1376,225 dan pada panjang gelombang ( λ ) 450 adalah 1466,846 [total area dapat dilihat di lampiran print out data hasil scanning]. Panjang gelombang ( λ ) dengan total area yang lebih banyak adalah panjang gelombang yang lebih maksimal dalam membaca area bercak/noda pada lempeng KLT, dan dapat disimpulkan bahwa panjang gelombang ( λ ) optimumnya yaitu pada panjang gelombang ( λ ) 450.

VIII.            KESIMPULAN

·         Panjang gelombang ( λ ) optimum diperoleh dengan melakukan scanning pada beberapa bercak/noda pada lempeng KLT sekaligus

·         Panjang gelombang ( λ ) optimum adalah panjaang gelombang yang dapat menampilkan beberapa pick/warna sekaligus

·         Panjang gelombang ( λ ) optimum pada praktikum kali ini adalah panjang gelombang ( λ ) 450

 IX.            DAFTAR PUSTAKA

R. Stock and C. B. F. Rice. “Chromatographic methods” 2nd edition, 1967. Chapman                   and Hall Ltd., and Science Paper backs.

R. J Bannec, The Australian Science Teachers Journal. December

 1972, Vol. 18 no 4 p 79-84

Hostettmann. M, Hostettmann.K,Marston.A,cara kromatografi preparatif,1995.ITB Bandung

                http://greenhati.blogspot.com/2009/01/kromatografi-lapis-tipis.html